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                                                    大鼠胰島素細胞傳代的方法

                                                    發布時間: 2021-12-09  點擊次數: 272次

                                                    大鼠胰島素細胞傳代方法:我們在收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。


                                                    如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:

                                                    1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

                                                    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來。

                                                    3. 加入6-8ml完全培養基,吸出,分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次?!?/p>

                                                    細胞

                                                    如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。


                                                    細胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細胞庫,所有細胞均為原代細胞,非細胞系。細胞經過嚴格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),純度可達98%。不同的細胞傳代次數不一。多數細胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。大鼠胰島素細胞采用干冰運輸,客戶收到細胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復蘇培養。美國ATCC細胞庫、ScienCell實驗室的細胞、培養基都是經過嚴格檢驗,分離、配制而成,產品質量過硬。

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